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pcr模板是什么意思(PCR的模板可以是)

网站建设2年前 (2023-01-24)1022

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pcr的模板可以是蛋白质吗

pcr的模板可以是蛋白质.

PCR模板制备是PCR实验的首要步骤,模板制备是从待分析样本中纯化和浓缩核酸(DNA或RNA)以作为PCR扩增模板的过程。由于PCR用途多样,用于提取核酸的材料可能是全血、动植物组织、培养细胞、口腔涂片、体液、甚至是1700万年前到2000万年前的木兰叶化石。对于不同类型的样本,需要利用不同的方法进行核酸提取。

PCR模板制备指的是从样本中提取核酸的过程,涉及到裂解细胞、蛋白变性、酚-氯仿抽提、乙醇沉淀等步骤,裂解细胞法有酶解法:溶酶菌、蛋白酶K、蜗牛酶等。蛋白酶K适用所有标本的消化处理,蜗牛酶常用于酶解真菌,溶酶菌可以对细菌进行裂解。

PCR是什么意思呀?

PCR(聚合酶链式反应)技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性→退火→延伸三个基本反应步骤构成:

①模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备。

②模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合。

③引物的延伸:DNA模板--引物结合物在72℃、DNA聚合酶(如TaqDNA聚合酶)的作用下,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基互补配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链。

重复循环变性→退火→延伸三过程就可获得更多的“半保留复制链”,而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2~4分钟,2~3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。

扩展资料:

PCR反应条件为温度、时间和循环次数。温度与时间的设置:基于PCR原理三步骤而设置变性-退火-延伸三个温度点。在标准反应中采用三温度点法,双链DNA在90~95℃变性,再迅速冷却至40~60℃,引物退火并结合到靶序列上,然后快速升温至70~75℃。

在Taq DNA聚合酶的作用下,使引物链沿模板延伸。对于较短靶基因(长度为100~300bp时)可采用二温度点法,除变性温度外、退火与延伸温度可合二为一,一般采用94℃变性,65℃左右退火与延伸(此温度Taq DNA酶仍有较高的催化活性)。

参考资料:百度百科-聚合酶链式反应

利用PCR扩增目的基因,那模板是和目的基因有关吗?

PCR合成的时候当然不只是需要引物,模板链也就是目的基因片段是必须的。

因为DNA聚合酶合成DNA时只能从一段已有的DNA片段往上加脱氧核苷酸延伸子链,而不能从头合成,所以需要一段引物。引物就是目的基因在5'段的一小段序列,在于模板链结合后,Taq酶对其延伸完成复制。

所以说模板不仅仅是和目的基因有关,应该其本身就是或含有目的基因。

pcr模板可以是蛋白质吗

不可以。

因为PCR是一种体外扩增DNA的技术,PCR也叫聚合酶链式反应,是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链,低温(经常是60°C左右)时引物与单链按碱基互补配对的原则结合,再调温度至DNA聚合酶最适反应温度(72°C左右),DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5“-3“)的方向合成互补链。

多重pcr的模板是什么

没有模板。多重pcr本身就是模板,导致没有模板,该产品是由进行构思并制作的。模板,是指作图或设计方案的固定格式,有时也指DNA复制或转录时,用来产生互补链的核苷酸序列。模板是将一个事物的结构规律予以固定化、标准化的成果,它体现的是结构形式的标准化。

pcr技术扩增目的基因时,所选取的模板是什么?PCR技术扩增基因的模板是什么?它们之间有何区别?

你好,你要扩增哪里,那里就是你的说的目的片段。和基因本身没有什么具体关系。可以扩增基因内的一部分序列(内含子也好、外显子也好、内含子+外显子也好),可以扩增基因外的间隔序列,完全是根据实验需要来定的。

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