1、定量PCR的模版既可以使总DNA，也可以是cDNA，但两种做法的用途不同如果用总DNA做模版，你检测的就是总DNA的拷贝数如果以cDNA为模版，你检测的就是某个基因的表达水平。

2、你好，你要扩增哪里，那里就是你的说的目的片段和基因本身没有什么具体关系可以扩增基因内的一部分序列内含子也好外显子也好内含子+外显子也好，可以扩增基因外的间隔序列，完全是根据实验需要来定的。

3、PCR合成的时候当然不只是需要引物，模板链也就是目的基因片段是必须的因为DNA聚合酶合成DNA时只能从一段已有的DNA片段往上加脱氧核苷酸延伸子链，而不能从头合成，所以需要一段引物引物就是目的基因在5#39段的一小段序列。

4、TE溶解更容易，更主要的原因是利用EDTA螯合金属离子，因为金属离子是DNA酶的辅基，这样就可以防止DNA被降解不过，这跟做PCR没有什么关系，如果模板不是长期保存的，我就用双蒸水溶解，做PCR效果和TE溶解的一样TE只是习惯上用来。

5、PCR技术的基本原理该技术是在模板DNA引物和四种脱氧核糖核苷酸存在下，依靠于DNA聚合酶的酶促合成反应DNA聚合酶以单链DNA为模板，借助一小段双链DNA来启动合成，通过一个或两个人工合成的寡核苷酸引物与单链DNA模板中。

6、PCR的原理该技术是在模板DNA引物和四种脱氧核糖核苷酸存在下，依赖于DNA聚合酶的酶促合成反应DNA聚合酶以单链DNA为模板，借助一小段双链DNA来启动合成，通过一个或两个人工合成的寡核苷酸引物与单链DNA模板中的一段。

7、应该是指样品中DNA样品的来源或种类例如，如果提取的是基因组DNA，由于基因组DNA数量比较多，引物可能会与多个位点结合，需要优化PCR条件，否则可能获得非特异扩增，或是没有扩增结果而如果纯化的是质粒DNA，模板复杂度就低。

8、除非你做巢式PCR以PCR产物作为模板，首先必须保证你的PCR产物经过纯化，成分单一，因此，无论怎样，第一轮PCR产物都要进行纯化，并且必须使用高保真酶以减少碱基错配的可能这样才能以第一轮PCR产物为模板进行第二轮扩增。

9、两个都可以双链当然可以，单链的话只要与其中一个引物结合延伸，就成双链了。